可见分光光度计是一种用于对可见光区域内物质进行定量和定性分析的仪器。
一、工作原理
1.吸收原理:
基于朗伯 - 比尔定律。
当一束平行可见光通过均匀的、非散射的吸光物质溶液时,溶液对光的吸收程度与吸光物质的浓度和液层厚度的乘积成正比。
即A=εcl,其中A为吸光度,ε为摩尔吸光系数,c为溶液浓度,l为液层厚度。
2.光路系统:
可见分光光度计的光源一般采用钨灯,它能发射出波长范围在320 - 2500nm的连续光谱,其中可见光区域为400 - 760nm。
光源发出的光经过单色器,单色器的作用是将复合光分解成单色光,通常采用棱镜或光栅作为色散元件。
然后单色光通过样品池,其中放置有待测溶液,溶液对特定波长的光有吸收作用,最后通过检测器检测透过溶液后的光强度。
二、可见分光光度计结构组成
1.光源:如前面所述,钨灯是常见的光源,提供稳定的可见光辐射。
2.单色器:棱镜单色器利用不同波长的光在棱镜中的折射率不同而进行分光;光栅单色器则是通过光栅的衍射和干涉作用将复合光分解成单色光,光栅单色器具有更高的分辨率。
3.样品池:一般由玻璃或石英制成,有不同规格的比色皿,常见的有1cm、2cm等,用于盛放待测溶液。
4.检测器:通常采用光电管或光电倍增管,将透过样品后的光信号转换为电信号,再经过放大电路放大后进行测量。
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